Differential gene expression in cells from Fabry and Gaucher diseases: cell reprogramming and culture aging

Gene expression varies deeply, even in the same individual’s cells, depending on stress factors, cell aging, gene variants or gene and cell manipulation In this work, gene expression can be seen to shift in many genes, using fibroblasts from donors with Fabry and Gaucher type 3 genetic diseases Tests were also made to compare the impact of aging cultures Real time qRT PCR protocols for genes of interest were used for expression comparison after cell induction and reprogramming.FCT project PTDC/BIM-MEC/4762/2014 (CeMoLy)info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Come together: Democracy matters in art mediation

Art mediation is a discipline in the field of Visual Culture, which is, nowadays, part of most of museums’ public programs. In general lines, it consists of strategies dedicated for audiences to interact with the life of museums as spaces of social and cultural encounters. “Come together – Democracy matters in art mediation” is a study on the multiple relations played out in art mediation – relations of power, justice, and transformations in the lives of publics, museums, and art mediators. These relations are examined: 1) in the framework of canonical theories in the field of arts, politics, economy and culture; 2) through assessment of interviews with workers from the field of art mediation combined with exposition of specialists’ knowledge in the discipline of cultural mediation; 3) through the production of a script for a short fiction movie about a mediated visit to a museum that doesn’t go quite like the expected. These three methods are employed to cast light over the contradictory problems of power in museums as democratic institutions - their practices are able to produce challenges towards hegemonic power, however, at the same time, these efforts are ineffective in enhancing justice and freedom in the lives of people who are involved with art mediation

Projecto de intervenção social: desenvolvendo o centro comunitário do centro paroquial de Paderne

Apresenta-se um projecto de intervenção social, no âmbito de um Centro Comunitário, desenvolvido numa instituição com respostas sociais já definidas e tendo presente a intervenção de um grande número de parceiros, entre eles a população da própria Instituição. O equipamento social “Centro Paroquial de Paderne”, foi construído para dinamizar a comunidade envolvente, no âmbito de diversos projectos, no entanto encontra-se mais direccionado nas respostas sociais à terceira idade e à primeira infância. Neste sentido, surge a necessidade crescente de desenvolver iniciativas ou projectos que envolvam a comunidade, para servir de suporte às famílias, indivíduos e a grupos sociais desfavorecidos na sua sociedade. Neste sentido, foi efectuado um diagnóstico das necessidades desta Instituição, que envolveu a mesma, assim como a comunidade de Paderne, e a partir deste diagnóstico foi elaborado um projecto com vista a desenvolver uma nova resposta social no âmbito comunitário. As principais conclusões a que chegamos é que a Instituição está integrada numa comunidade que necessita cada vez mais de ajuda e para isso, é necessário criar respostas sociais dinâmicas, que ajudem a comunidade onde se encontram os grupos sociais mais desfavorecidos, e com maiores carências a encontrar soluções para os seus problemas

Perceived Environmental Supportiveness Scale: Portuguese Translation, Validation and Adaptation to the Physical Education Domain

Aim: Grounded on Self-Determination Theory, this study aimed to translate, adapt and validate the Perceived Environmental Supportiveness Scale (PESS) in a sample of Portuguese physical education students. Methods: The global sample was comprised of 964 students (518 females), divided in two groups: the calibration (n = 469) and the validation one (n = 483), all of them enrolled in two Physical Education (PE) classes/week. Results: The analysis provided support for a one factor and 12 items model, which are in line with the values adopted in the methodology (χ² = 196.123, df = 54, p = <.001, SRMR = .035, NNFI = .943, CFI = .954, RMSEA = .074, 90% CI .063-.085). Results express that the models are invariant in all analysis (i.e., calibration vs. validation, male vs. female,and 3rd vs. secondary cycle; three and single factor models). Conclusion: The present study suggests that the PESS with one factor and 12 items has good psychometric properties and can be used to assess perceived need supportive motivational environments provided by PE teachers. Additionally, invariance analysis showed support for the use of the scale in both genders and in the 3rd and secondary cycles.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Biometric recognition based on the texture along palmprint lines

Tese de Mestrado Integrado. Bioengenharia. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 201

Investigation of Absolute Refractory Period Pacing to Prevent Lethal Arrhythmias in Humans

Sudden cardiac death (SCD) is a major health issue, being the commonest cause of natural death in the industrialised world. SCD frequently results from the development of erratic heart rhythms which are usually preceded by repolarisation alternans (RA). Previous studies suggest that the abolishment of RA may prevent the onset of arrhythmia. In a recent swine study, absolute refractory period pacing (ARPP) showed promising results in RA modulation. However, the cellular mechanisms underlying this therapy and its efficiency in human patients remains unclear. Single cell in silico modelling showed that ARPP might be used to both increase or decrease action potential duration (APD) with the degree of modulation depending mainly on stimulus duration, magnitude and coupling interval. ICaL, IKr and IK1 were the main currents involved, and conductance of Ito and ICaL strongly influenced results. APD alternans was successfully reduced in a population of alternating models. In vivo results obtained using an epicardial sock during cardiac surgery showed significant changes in repolarisation when applying ARPP. However, elevated morphological signal alterations led to question the results’ validity. The investigation of signal processing methodology led to the acknowledgement of high-pass filter interference in signal morphology due to the ARPP artefact, resulting in altered markers. Further in vivo data showed no significant effect of ARPP on local RT at the whole heart level. Small effects on RT, spectral method and Tend markers close to the pacing site were observed, suggesting a localised effect. One dimensional in silico modelling showed a rapid decline of the ARPP effect, being limited to around 10mm from the pacing site, correlating with the in vivo results. These results provide important new knowledge regarding the effects of ARPP in the human ventricle at the cellular and organ level. It also provides relevant information for further development, analysis and translation of pacing based therapies

Portuguese physiotherapists’ self-efficacy and preparedness for patient education practice: a mixed methods study

Introdução: A educação centrada no utente é reconhecida como parte integrante da prática efetiva em fisioterapia. A literatura atual sugere que os fisioterapeutas recém-licenciados, que intervêm com utentes com condições músculo esqueléticas, podem não estar adequadamente preparados para implementar esta modalidade de intervenção de forma efetiva. Estes profissionais tendem a identificar mais barreiras e desafios, comparativamente aos fisioterapeutas mais experientes. Objetivos: O objetivo deste estudo foi analisar a autoeficácia e explorar a preparação de fisioterapeutas recém-licenciados para utilizar a educação, enquanto modalidade terapêutica integrada no tratamento de utentes com condições músculo-esqueléticas. Metodologia: Foi implementado um estudo misto sequencial explanatório, que combinou métodos quantitativos (1ª fase) e métodos qualitativos (2ª fase). Na 1ª fase, os participantes responderam a um questionário relativo à autoeficácia para uma prática de educação ao utente. Na 2ª fase, foram realizadas entrevistas individuais, semiestruturadas, gravadas em formato áudio. Os dados foram transcritos na íntegra, para posterior análise temática. Resultados: 151 fisioterapeutas recém-licenciados participaram na 1ª fase. Os itens que obtiveram a pontuação de autoeficácia mais alta foram: "Compreendo o papel da educação ao utente" e "Compreendo o impacto de fatores sociais, culturais e comportamentais na aprendizagem do utente". O item com a pontuação mais baixa foi: "Sinto-me confiante em reconhecer e gerir de forma eficaz barreiras à efetividade da educação". Na 2ª fase do estudo, foram realizadas 12 entrevistas. Na análise qualitativa foram identificados quatro temas: (1) perspetivas acerca da prática de educação ao utente, (2) desafios em torno da prática de educação ao utente, (3) preparação para uma prática de educação ao utente, e (4) reflexões sobre a formação base. Conclusões: Os participantes demonstraram níveis elevados de autoeficácia na maioria dos itens para a educação ao utente. A análise das entrevistas evidenciou dificuldades em gerir barreiras no uso da educação ao utente e na abordagem de condições clínicas complexas. Os participantes percecionaram que a sua formação base poderá não ter sido suficiente para a preparação para a prática de educação ao utente. Uma abordagem mais aprofundada da educação ao utente e o contacto com utentes reais foram vistas como experiências de aprendizagem com potencial para aumentar a perceção de preparação para uma prática de educação ao utente.Background: Patient-centred education is recognized as an integral part of effective physiotherapy practice. Current literature suggests that novice physiotherapists, working with patients with musculoskeletal conditions, may not be adequately prepared for patient education practice. They seem to identify more barriers to effective patient education practice, than their experienced colleagues. Objectives: This study aims to examine the self-efficacy of Portuguese novice physiotherapists for patient education practice and to explore their perceived preparedness to use patient education practice in their work context and the impact of their pre-professional training. Methods: An explanatory sequential mixed methods research design was used, combining quantitative (1 st phase) and qualitative (2 nd phase) methods. In the 1st phase, participants completed a self-efficacy survey regarding their patient education practice. In the 2nd phase, qualitative data collection was carried out through one-to-one, semi-structured interviews. The interviews were recorded in audio format and the data transcribed verbatim for subsequent thematic analysis. Results: 151 novice physiotherapists participated in the 1st phase. The items with the highest score were: “I understand the role of patient education” and “I understand the impact of social, cultural, and behavioral variables on patient learning”. The item with the lowest self-efficacy score was “I feel confident to recognise and effectively manage barriers to effective education”. In the 2nd phase, 12 interviews were completed. Four themes were generated: (1) perspectives of patient education practice, (2) challenges around patient education practice, (3) preparedness for patient education practice, and (4) reflections on pre-professional training. Conclusion: Novice physiotherapists demonstrated high self-efficacy in most aspects of patient education. Interview analysis showed difficulties in managing barriers to use patient education practice and in addressing complex conditions. Participants perceived that their undergraduate training may not have been sufficient to prepare them for patient education practice. A more in-depth approach to patient education and contact with real patients were seen as learning experiences with the potential to improve the perception of preparation for patient education practice

Nanoparticles as ocular drug delivery systems

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2019As doenças oculares como o glaucoma, degeneração macular relacionada com a idade, olho seco, entre outras, têm vindo a apresentar uma prevalência cada vez maior na população mundial e prevê-se um aumento destes números no futuro. Contudo, as terapêuticas convencionais continuam a apresentar muitas limitações devido não só às suas formulações, mas também às características anatómicas e fisiológicas do olho, um órgão único com muitas barreiras à administração de fármacos. Enquanto as gotas apresentam uma grande conveniência, elevada adesão à terapêutica por parte dos doentes e baixos custos económicos, mas uma baixa biodisponibilidade, as injeções conseguem ultrapassar mais facilmente as barreiras oculares, tendo maior biodisponibilidade, mas têm como inconvenientes uma baixa adesão à terapêutica, custos mais elevados e o facto de poderem danificar o globo ocular por serem métodos invasivos. Para solucionar estes problemas que acabam por ter um grande impacto no tratamento das doenças oculares, nos últimos anos tem-se vindo a investigar mais e mais o papel das nanopartículas como as nanomicelas, “nanowafers”, niossomas, lipossomas, micro-agulhas, dendrímeros e nanopartículas constituídas por polímeros como quitosano, ácido hialurónico, PEG, entre outros nas doenças oculares e a sua incorporação nas formulações convencionais a fim de aumentar a sua biodisponibilidade, diminuir a toxicidade ou potenciais efeitos adversos que advêm do próprio processo de administração de fármacos como por exemplo as injeções intravitreas e, como principal objetivo, aumentar a eficácia destas terapêuticas. Estas tecnologias têm alcançado resultados promissores devido à sua capacidade de encapsulamento de fármacos, elevada mucoadesão, que por sua vez leva a uma controlada e prolongada libertação do fármaco, a capacidade de penetrar nas camadas mais posteriores do olho e a biocompatibilidade que apresentam, prevenindo reações adversas. Mais recentemente, a inovação tem levado à combinação de várias nanopartículas para formar partículas híbridas que mostram melhores resultados comparativamente ao uso isolado de cada nanopartícula.The prevalence of ocular diseases like glaucoma, age-related macular degeneration (AMD), dry eye, among others, has increased on a world-wide scale and it is expected to grow even further in the foreseeable future. However, conventional therapies continue to present several limitations due to not only the nature of their formulations but also the eye’s anatomical and physiological characteristics, it being an unique organ with many barriers that affect drug delivery. While eye drops present themselves as a highly convenient method with low economic costs and a high patient compliance but with low bioavailability, eye injections can achieve high concentrations in the ocular globe but present lower patient compliance, higher costs and also bare the risk of damaging the ocular globe due to their invasive nature. In recent years, there has been an increase in the investigation surrounding nanoparticles as a way to overcome these problems that end up having a great impact on the treatment of ocular diseases overall. Nanoparticles such as nanomicelles, nanowafers, niosomes, liposomes, microneedles, dendrimers and nanoparticles made out of polymers like chitosan, hyaluronic acid, PEG, among others have been studied as systems to be incorporated in conventional therapies as a way to increase bioavailability, decrease toxicity or potential side effects deriving from more invasive methods such as intravitreal injections, and, in the end, as a way to increase therapeutic outcomes overall. These technologies have shown promising results due to their encapsulation characteristics, high mucoadhesion, that leads to a higher controlled release of the administered drug over a prolonged period of time, the ability to penetrate the inner layers of the ocular globe and high biocompatibility, which prevents adverse effects. More recently, innovation in this field has lead to the combination between different nanoparticles, achieving new hybrid particles that have shown better results compared to the usage of each nanoparticle type alone.Farmácia Moura Carneiro - Estágio Curricula

Palm leaf fungi in Portugal: ecological, morphological and phylogenetic approaches

Tese de mestrado, Microbiologia Aplicada, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019As palmeiras são um grupo de plantas monocotiledóneas altamente diversificado pertencentes à família Arecaceae. Esta família é representada por cerca de 2600 espécies distribuídas por 181 géneros. As palmeiras são maioritariamente nativas de regiões tropicais e subtropicais, desempenhando um papel importante nos ecossistemas onde se inserem, pela sua elevada adaptabilidade e também pela utilidade dos seus produtos. Entre os membros da família Arecaceae encontram-se algumas das culturas de plantas mais cultivadas mundialmente devido à sua importância económica, tais como a tamareira (Phoenix dactylifera), o coqueiro (Cocos nucifera) e a palmeira-de-dendém (Elaeis guineensis). Devido à sua elevada capacidade de adaptação a uma ampla gama de condições climáticas, as palmeiras são muito apreciadas e utilizadas como plantas ornamentais, nomeadamente em climas mediterrâneos. Sendo das plantas mais características dos climas tropicais, as palmeiras conferem às paisagens mediterrâneas o aspecto exuberante e o fascínio dos trópicos, sendo utilizadas com muita frequência em alinhamentos de espaços públicos, em arranjos paisagísticos, na composição de jardins e, ainda, como plantas de interior. Esta utilização das palmeiras no paisagismo urbano, largamente associado ao desenvolvimento do turismo, fez crescer consideravelmente a utilização destas plantas em países no sul da Europa. A importação das palmeiras das suas regiões nativas, bem como o recente impacto do escaravelho das palmeiras, Rhynchophorus ferrugineus, na devastação das palmeiras das Canárias (Phoenix canariensis) tem suscitado preocupações relativas a eventuais ameaças fitossanitárias relacionadas com a introdução de agentes fitopatogénicos exóticos, nomeadamente de fungos. Um dos principais tipos de doenças causados por fungos em palmeiras corresponde às lesões foliares. Neste contexto, os fungos associados às lesões foliares de palmeiras constituem o âmbito da presente dissertação. Em décadas recentes, verificou-se uma grande expressão dos estudos de fungos associados a palmeiras em diferentes áreas da Micologia. Estes fungos começaram a ser considerados uma comunidade taxonomicamente diversa e importante, coloquialmente apelidada de “fungos de palmeiras”. Ainda que a maioria destes estudos tenha utilizado uma abordagem de taxonomia descritiva, a partir da qual inúmeras espécies e géneros foram formalmente identificados e descritos como novos para a ciência, apenas alguns destes estudos tiveram como objecto a exploração da biodiversidade e/ou ecologia dos fungos de palmeiras. Tendo em conta as características das palmeiras enquanto hospedeiros de excelência para a descoberta de novos fungos, o presente trabalho compreendeu dois objectivos distintos. O primeiro consistiu em avaliar a diversidade e a ecologia dos fungos que se encontram associados a lesões foliares de palmeiras ornamentais em Portugal. O segundo objectivo consistiu em contribuir para a descoberta de novos taxa para a ciência, uma vez que esta é actualmente uma das principais tarefas dos micólogos, i.e. o preenchimento da lacuna entre o número de espécies de fungos actualmente descritas e o número de espécies que as mais recentes estimativas preveem. Assim, esta dissertação encontra-se estruturada em duas partes: na Parte I foram aplicadas abordagens ecológicas para o estudo integrado da biodiversidade das comunidades de fungos associadas a lesões foliares de palmeiras e na Parte II foram aplicadas abordagens taxonómicas a determinados isolados, para estudar o seu posicionamento filogenético. O esforço de amostragem resultou num total de 78 lesões foliares a partir de palmeiras sintomáticas de Oeiras e Lisboa. As lesões foliares foram morfologicamente caracterizadas e serviram como base para o isolamento de fungos a elas associados, para o que foram utilizados vários métodos de isolamento para que as comunidades fúngicas recolhidas se encontrassem devidamente representadas. Em algumas lesões o isolamento compreendeu a observação e manipulação de estruturas fúngicas presentes no tecido hospedeiro. Adicionalmente, todas as lesões foram sujeitas a um método de isolamento directo, o qual compreendeu a esterilização superficial de porções das lesões, que foram, posteriormente, inoculadas em PDA. Para todos os isolados obtidos foram estabelecidas culturas puras provenientes de um único esporo. A colecção estabelecida compreendeu 457 fungos filamentosos. Estes foram caracterizados de acordo com as suas características micro- e macromorfológicas, as quais permitiram a sua identificação até ao género. Posteriormente, o DNA genómico foi extraído de culturas de todos esses isolados, utilizando uma versão modificada e optimizada do método do tiocianato de guanidina. Estes extractos foram, seguidamente, utilizados para a obtenção de perfis genómicos de MSP-PCR, os quais foram baseados nos primers csM13 e (GTG)5. Os perfis genómicos obtidos foram agrupados em dendrogramas consenso construídos com o software BioNumerics, usando o coeficiente de correlação de Pearson e o método de aglomeração UPGMA. A análise destes dendrogramas de perfis genómicos foi utilizada, posteriormente, para avaliar e caracterizar a diversidade genética das comunidades dos fungos isolados. Para além dos métodos clássicos e moleculares de discriminação e monitorização de taxa referidos, diferentes análises para a avaliação da diversidade de comunidades de fungos foram aplicadas, incluindo o cálculo de índices de diversidade, a avaliação da distribuição da abundância dos diferentes géneros e, ainda, a avaliação de curvas de acumulação. Concomitantemente com as análises de biodiversidade e as observações ecológicas, determinados isolados foram seleccionados para a sequenciação de marcadores moleculares actualmente aceites e validados, os quais foram posteriormente utilizados para o seu posicionamento filogenético entre taxa actualmente descritos. Para o efeito, foram efectuadas análises filogenéticas por máxima verossimilhança e por máxima parcimónia, com recurso aos softwares RAxML e PAUP, respectivamente. Um total de 57 géneros foi identificado na colecção de isolados estabelecida. A composição geral da comunidade fúngica associada às lesões foliares foi bem descrita por um modelo log-series, na medida em que apresentou um padrão bem definido de co-dominância de três géneros, nomeadamente Alternaria, Cladosporium e Phoma, e uma elevada profusão de géneros infrequentes e raros. A considerável diversidade de géneros identificados era expectável e está concomitante com estudos anteriores. Deste modo, verificou- -se que a comunidade de fungos associada a lesões foliares de palmeiras apresenta uma ampla distribuição taxonómica, na qual duas ordens do filo Ascomycota se encontraram particularmente bem representadas, Pleosporales e Capnodiales. Apenas um dos isolados obtidos, do género Graphiola, pertenceu ao filo Basidiomycota, sendo todos os restantes isolados pertencentes ao filo Ascomycota, o que também era expectável tendo em conta estudos anteriores. Na colecção estabelecida, a comunidade de coelomicetes apresentou uma maior diversidade quando comparada com a comunidade de hifomicetes, na medida em que incluiu a grande maioria dos géneros identificados como infrequentes e raros. Diferenças semelhantes entre coelomicetes e hifomicetes foram anteriormente reportadas em fungos isolados de palmeiras em climas temperados. Assim, o presente estudo sugere que a diversidade dos fungos de palmeiras em climas temperados parece estar particularmente concentrada na comunidade de coelomicetes. As abordagens ecológicas mostraram que as comunidades de fungos isolados estão sujeitas a processos dinâmicos associados quer à espécie do hospedeiro, quer ao contexto geográfico no qual as mesmas foram encontradas. Deste modo, enquanto as palmeiras tipicamente tropicais surgiram, na sua generalidade, empobrecidas em fungos, nas palmeiras tipicamente temperadas as comunidades de fungos foram mais diversas e abundantes, particularmente ao nível dos coelomicetes. Por sua vez, freguesias nas quais é expectável uma maior humidade relativa, atendendo ao contexto geográfico, apresentaram, também, comunidades de fungos mais diversas e abundantes. A aplicação integrada dos índices de diversidade, juntamente com a avaliação da distribuição da abundância dos diferentes géneros, previu que pouco mais de 50% da riqueza de géneros foi identificada no presente estudo. Assim, embora tenha sido registada uma enorme diversidade de géneros de fungos filamentosos, que permitiu em última análise estabelecer tendências ecológicas primárias, o presente estudo está longe de ter registado a potencial diversidade que se encontra associada a lesões foliares de palmeiras em Portugal. Apenas uma abordagem integrada com dados morfológicos e moleculares associada a uma maior amostragem, bem como à execução de réplicas no isolamento, poderá (a) revelar a potencial diversidade destas comunidades de fungos e (b) estabelecer de forma clara as observações e os padrões ecológicos aqui apontados. As análises filogenéticas revelaram um novo género, Arecamyces gen. nov., e quatro novas espécies, Diaporthe chamaeropsicola, Morinia trachycarpae, Morinia phoenicicola e Arecamyces humilianae spp. nov., para a ciência, os quais foram formalmente descritos e ilustrados. O presente estudo, embora baseado numa amostragem relativamente pequena, mostrou que as palmeiras continuam a ser um hospedeiro de excelência para a pesquisa de novos taxa, bem como um modelo para estudos de biodiversidade e abordagens ecológicas que possam revelar as dinâmicas das comunidades de fungos. Considerando que apenas 3% dos isolados obtidos foram totalmente caracterizados, espera-se que outros novos taxa sejam descritos em estudos futuros. Por fim, este estudo de fungos associados a lesões foliares de palmeiras ornamentais em Portugal é pioneiro e representa uma inovação na investigação do conhecimento fundamental.Palm trees (Arecaceae) are a diverse group of monocotyledons distributed across the tropics. Some members of this family are economically important crops and others are highly prized as ornamentals, particularly in Mediterranean climates. Anything that diminishes palm attractiveness, such as foliar lesions, will have a negative impact in their aesthetic value. In the last 30 years there has been a profusion of studies on palm fungi, a taxonomically diverse and important community. Although most of these studies used a descriptive taxonomy approach, from which many species and genera were formally identified and described as new to science, only some of these studies were focused on biodiversity and/or ecology. Considering that palm trees are a plant model for studying fungal diversity, and that fungi are one of the main causes of palm foliar lesions, a preliminary assessment of the fungal assemblage on palms was carried out. For this a total of 78 foliar lesions on palm leaves were studied. Following an isolation flow-chart, a collection of 457 isolates was established. All isolates were characterized according to their macro- and micro-morphology and assigned to genera. Their genetic diversity was assessed by PCR fingerprinting using csM13 and (GTG)5. Diversity indices were computed, and assessments of genera-abundance distribution and genera accumulation curves were also performed. Selected isolates were identified by sequencing of accepted DNA barcodes. A total of 57 genera were found. The general composition of the fungal community was well described by a log-series model, showing a pattern of dominance of very few genera, and a high profusion of infrequent and rare genera. From the ecological approaches it was found that the fungal communities are subjected to dynamic processes associated with both the host species and the geographical context. Phylogenetic analyses revealed one new genus and four new species, which are here formally described. This study is pioneer in Portugal, representing a significant advance in the fundamental knowledge on palm fungi